為了減少非法添加違禁藥物的現象，2013年5月1日，佛山開始試行水產品產地標識準入制，對桂花魚、生魚、黃骨魚三種價格較昂貴的魚類配上“身份證”，即追溯碼，可以查到具體的魚塘，該規定試行至今3個月，其中有2個月查出魚類非法添加了孔雀石綠。根據佛山市農業局發布的7月份農產品質量安全風險監測情況，高明區的2份草魚樣本查出孔雀石綠殘留。有統計發現，2013年以來魚類產品已經4次查出孔雀石綠殘留。害魚的孔雀石綠究竟是什么？其有何危害而不能用于水產品？有沒有有力的檢測手段呢？本文將一一解答。
孔雀石綠是什么
孔雀石綠是一種帶有金屬光澤的綠色結晶體，因顏色與孔雀石相近而得名，又名堿性綠、孔雀綠。其分子式為C23H25ClN2，極易溶于水，水溶液呈蘭綠色。孔雀石綠是一種三苯甲烷類化工染料，以往僅在制陶業、紡織業、皮革業、細胞化學染色劑和指示劑等方面有所使用。自1933 年起孔雀石綠開始作為驅蟲劑、殺菌劑、防腐劑在水產養殖中出現，而后因為具有價格低廉、效果顯著等優點，而被廣泛用于活魚運輸及各類水產動物疾病的預防和治療。
孔雀石綠
孔雀石綠有何危害
但隨著研究的深入，孔雀石綠潛在的毒副作用受到了關注。研究發現，孔雀石綠進入水生動物體內后，會快速代謝成脂溶性的無色孔雀石綠。孔雀石綠具有潛在的致癌、致畸、致突變的作用，其在養殖業中的使用未得到美國食品與藥物管理局( FDA ) 的認可；根據歐盟法案2002 /675 /EC的規定，動物源性食品中孔雀石綠和無色孔雀石綠殘留總量限制為2μg/kg；日本的肯定列表也明確規定在進口水產品中不得檢出孔雀石綠殘留；我國在農業行業標準《NY5071- 2002無公害食品魚藥使用準則》中也將孔雀石綠列為禁用藥物。但由于沒有低廉有效的替代品，孔雀石綠在水產養殖中的使用屢禁不止，這就給監管部門的檢測監控提出了難題。
孔雀石綠的檢測
如上所述，孔雀石綠在水生動物體內迅速代謝成物色孔雀石綠，而無色孔雀石綠的毒性甚至超過孔雀石綠，所以我們通常將孔雀石綠和無色孔雀石綠的總量作為動物源性食品中孔雀石綠殘留的限量指標。目前，孔雀石綠的檢測方法以理化檢測法和免疫學檢測法為主。其中理化檢測法包括：薄層層析法、分光光度法、 高壓液相色譜法、液相色譜質譜聯用法、氣相色譜質譜聯用法等。但這些檢測方法步驟繁雜，設備昂貴，對操作人員要求要高，不宜普及推廣，相較之下免疫學檢測方法更為常用。
酶聯免疫檢測法（ELISA）：酶聯免疫法的基本原理是將酶分子與抗體分子共價結合，結合產物不會改變抗體的免疫學特性，也不影響酶的生物學活性。此種酶標抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發生特異性結合。底物可在酶的作用下使其所含的供氫體由無色的還原型轉變成有色的氧化型，出現顏色反應，顏色反應的深淺與樣品中相應抗體或抗原的量呈一定的比例，顯色反應可通過酶標儀進行定量測定。ELISA方法是一種既特異又敏感的檢測方法，可分為： 間接競爭抑制法、抗體/抗原包被直接競爭法和夾心法。
孔雀石綠的ELISA檢測法采用的是間接競爭抑制法，是用人工抗原包被酶反應板后加入抗血清和待測藥物進行競爭性結合反應，洗滌后板上只留有與包被抗原結合的抗體(一抗) ，再加酶標記物的二抗與一抗結合，洗滌后加入酶的底物。酶催化反應的產物量與被結合的一抗和二抗量呈正比，與待測樣品中相應的藥物量呈反比。其特點在于一個一抗可結合多個二抗，放大待測物的量，提高了方法的靈敏度。目前商品ELISA孔雀石綠試劑盒，都只能檢測孔雀石綠總量，不能同時檢測孔雀石綠和無色孔雀石綠各自的含量，在樣品前處理過程中應注意根據抗原和抗體的類型，將目標化合物全部轉化成相對應的形態。
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孔雀石綠快速檢測水溶性非食用色素試劑盒檢測速度快，靈敏度高，操作簡單，性價比高，特別適合大批量樣品的篩選。但需要注意的是：雖然ELISA 法的抗原和抗體結合有較強的選擇性，但水產品的種類繁多，基質復雜，檢測結果的假陽性幾率較高。因此，用該方法檢出的陽性樣還需用進一步通過高壓液相色譜法或液相色譜質譜聯用法進行定量和確證。
孔雀石綠作為一種化工常用原料，難以禁止其生產；且其價格低廉、防治某些水產病害效果明顯，對其進行控制有一定的難度。但是孔雀石綠潛在的毒副作用是不容忽視的，我們需要加強對孔雀石綠的了解，建議養殖從業者自覺使用較為安全的漁場殺蟲和殺菌劑，加大監管力度，盡快研究出孔雀石綠的替代藥物。
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